2019年12月7日-10日，第61屆美國血液學(xué)年會（ASH）在美國奧蘭多舉行。徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院血液科共7項研究成果獲選本次大會壁報交流——其中1項獲得2019 ASHAbstract Achievement Award（優(yōu)秀摘要獎）——展示了CAR-T細(xì)胞治療急性淋巴細(xì)胞白血病和B細(xì)胞淋巴瘤的臨床療效以及細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）和免疫功能不良反應(yīng)的臨床結(jié)果，匯報了急性淋巴細(xì)胞白血病、彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤以及異基因造血干細(xì)胞移植方面的基礎(chǔ)研究最新進(jìn)展。

徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院血液科CAR-T團(tuán)隊近年來通過與江蘇省腫瘤生物治療研究所等多家研究中心、企業(yè)的聯(lián)合攻關(guān)，已研發(fā)了多款CAR-T治療產(chǎn)品，通過臨床轉(zhuǎn)化研究進(jìn)一步將CAR-T技術(shù)應(yīng)用于晚期白血病、淋巴瘤、骨髓瘤等惡性血液腫瘤患者，取得了較好的治療效果。相信隨著研究的不斷深入，越來越多的血液腫瘤患者將受益于CAR-T治療技術(shù)。

ASH年會是全球血液學(xué)領(lǐng)域最大、最全面的國際盛會，涵蓋惡性與非惡性血液病相關(guān)的臨床與基礎(chǔ)研究。本次年會共有來自全球100多個國家的25000余名血液病專家和相關(guān)人士參會。

（血液科）

臨床CAR-T治療篇

壁報：曹江教授報道了人源化CD19 CAR-T治療難治/復(fù)發(fā)兒童或成人急性淋巴細(xì)胞白血病的最新研究成果

已有研究證實CD19 CAR-T可有效治療難治/復(fù)發(fā)的急性B淋巴細(xì)胞白血?。≧/RB-ALL），但緩解后再次復(fù)發(fā)依然是全球CAR-T治療領(lǐng)域急需解決的難題之一。有研究顯示CAR結(jié)構(gòu)中可特異性結(jié)合腫瘤抗原的單鏈抗體免疫原性可影響CAR-T在體內(nèi)的存活時間，從而導(dǎo)致ALL的復(fù)發(fā)。

曹江教授團(tuán)隊?wèi)?yīng)用人源化CD19 CAR-T細(xì)胞（hCART19）治療了51例兒童或成人R/RB-ALL患者。研究結(jié)果顯示在46例既往沒有接受過CAR-T治療的患者中，38例（82.6%）患者在治療1個月后獲得了完全緩解。在5例既往接受鼠源CD19 CAR-T治療緩解后再次復(fù)發(fā)的患者中，2例患者應(yīng)用hCART19細(xì)胞再次緩解。所有患者6個月無事件生存率及總生存率為63%及79%，12個月無事件生存率及總生存率為44%及67%。30例（58.8%）患者發(fā)生了輕度細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS），僅11例（21.6%）患者發(fā)生了嚴(yán)重CRS。4例（7.8%）患者發(fā)生了可逆的神經(jīng)毒性。

本研究顯示人源化CD19 CAR-T細(xì)胞可有效治療兒童或成人R/RB-ALL，并且相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生率較低，有望成為B-ALL患者新的治療選擇。

壁報：桑威教授報告CAR-T治療復(fù)發(fā)/難治DLBCL的臨床研究結(jié)果

對于復(fù)發(fā)/難治DLBCL，化療聯(lián)合自體干細(xì)胞移植治療效果不容樂觀，反應(yīng)率較低。CD19 CAR-T細(xì)胞治療對復(fù)發(fā)/難治性B細(xì)胞淋巴瘤有顯著療效，但是單靶CAR-T細(xì)胞治療后，抗原丟失可能導(dǎo)致治療失敗。徐醫(yī)附院血液科采用抗CD19聯(lián)合抗CD20 CAR-T細(xì)胞療法治療復(fù)發(fā)/難治DLBCL，旨在提高患者的治療效果，解決抗原丟失問題。

本研究報告了應(yīng)用抗CD19聯(lián)合抗CD20 CAR-T細(xì)胞治療21例復(fù)發(fā)/難治DLBCL患者的有效性和安全性。21例患者CR率52.4%，ORR 81%。15例（71.4%）發(fā)生1-2級CRS，6例（28.5）發(fā)生3-4級CRS，無5級CRS的發(fā)生；5例患者發(fā)生不用程度的CRES，都為自限性，無一例因為CRS及CRES死亡事件的發(fā)生；3級以上中性粒細(xì)胞減少癥11例（52.4%），貧血6例（28.6%），血小板減少癥6例（28.6%）。研究發(fā)現(xiàn)，抗CD19聯(lián)合抗CD20 CAR-T細(xì)胞治療復(fù)發(fā)/難治DLBCL療效顯著，不良反應(yīng)可控。這是我們首次報道抗CD19聯(lián)合抗CD20 CAR-T成功治療復(fù)發(fā)/難治DLBCL。我們的研究結(jié)果為進(jìn)一步多靶點CAR-T細(xì)胞治療提供了強(qiáng)有力的支持，這可能解決抗原丟失相關(guān)的治療失敗問題。

墻報：閆志凌主任報道CAR-T治療B細(xì)胞性惡性腫瘤后細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）的發(fā)生及危險因素分析

細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）是CAR-T治療中主要的不良反應(yīng)之一，雖然其臨床表現(xiàn)和處理方案已有大量的臨床經(jīng)驗積累，但是，CRS發(fā)生的危險因素仍需進(jìn)一步探索與分析。該研究分析了近年在徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院接受CAR-T治療各類B細(xì)胞性惡性腫瘤患者，對不同B細(xì)胞腫瘤患者接受CAR-T治療后各自CRS發(fā)生的特點進(jìn)行了描述，并對相關(guān)的危險因素進(jìn)行了詳細(xì)的分析，發(fā)現(xiàn)了多個既往未報道的危險因素，對CAR-T的臨床應(yīng)用中CRS的管理提供了更為詳細(xì)客觀信息。

墻報：王瑩博士報道CD19 CAR-T治療急性淋巴細(xì)胞白血病后免疫功能的動態(tài)變化

CA19 CAR-T細(xì)胞治療在急性B淋巴細(xì)胞白血病中取得了顯著療效。針對CD19的CAR-T細(xì)胞靶向作用于白血病細(xì)胞的同時，對正常的B淋巴細(xì)胞也具有殺傷作用，從而導(dǎo)致B細(xì)胞再生障礙，體液免疫受抑。目前關(guān)于CD19 CAR-T細(xì)胞治療后患者免疫恢復(fù)及重建的動力學(xué)改變，缺乏詳細(xì)報道。

該研究報道了復(fù)發(fā)難治性B細(xì)胞性急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）患者在接受抗CD19CAR-T細(xì)胞治療后淋巴細(xì)胞亞群及免疫球蛋白恢復(fù)的動態(tài)變化情況。CD19 CAR-T細(xì)胞治療后，不同免疫細(xì)胞亞群的重建速度不同：CD8+細(xì)胞恢復(fù)最快，其次是CD16+CD56+細(xì)胞，CD4+細(xì)胞的恢復(fù)最慢，CD4/CD8比例倒置，持續(xù)至少1年以上。所有患者均發(fā)生B細(xì)胞再生障礙及低免疫球蛋白血癥：在CAR-T細(xì)胞輸注約2周開始出現(xiàn)IgG、IgM及IgA下降。IgG月在細(xì)胞輸注后半年恢復(fù)正常；其次為IgM；IgA恢復(fù)最慢，CAR-T細(xì)胞治療后1年尚未恢復(fù)正常。觀察期間無因嚴(yán)重感染而死亡的患者。

基礎(chǔ)研究篇

墻報：徐林艷博士報道EHMT2 抑制劑通過誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號調(diào)控彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤凋亡

彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）是成人最常見的淋巴腫瘤亞型，近年來，治療方案的優(yōu)化以及新藥的不斷研發(fā)，DLBCL病人的生存率得到了很大的提高，但是仍有部分患者復(fù)發(fā)難治，情況不容樂觀。

本研究確定了組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶EHMT2 抑制劑BIX-01294對DLBCL細(xì)胞株有明顯的增殖抑制作用：BIX-01294引起細(xì)胞周期阻滯在G1期，并誘導(dǎo)DLBCL細(xì)胞凋亡；同時誘導(dǎo)了內(nèi)源和外源性細(xì)胞凋亡通路。通過深入探索機(jī)制，發(fā)現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路被活化，其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路的關(guān)鍵蛋白ATF3、ATF4、CHOP等表達(dá)明顯上調(diào)。通過干擾技術(shù)降低ATF3或者ATF4的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)明顯的抑制了BIX-01294誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，表明ATF3和ATF4調(diào)控BIX-01294誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖和凋亡。這些結(jié)果表明，組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的應(yīng)用可能為治療DLBCL的藥物開發(fā)提供新的思路。

墻報：王蓉碩士報道CARMA1可能在急性T細(xì)胞淋巴細(xì)胞白血病（T-ALL）中Notch1介導(dǎo)的NF-kB活化中發(fā)揮作用，該摘要獲得2019 ASH Abstract Achievement Award

急性T細(xì)胞淋巴細(xì)胞白血?。═-ALL）是一種惡性腫瘤，其發(fā)病機(jī)制尚不清楚且缺乏明確的治療靶點。Notch1信號通路在T-ALL中發(fā)揮重要作用，NF-κB通路在T-ALL中調(diào)節(jié)細(xì)胞生存并且是Notch1的一個主要下游。

我們前期發(fā)現(xiàn)CARMA1在T-ALL中高表達(dá)，并且CARMA1高表達(dá)的T-ALL病人預(yù)后相對更好。有文章報道Notch1突變與更好的預(yù)后相關(guān)，表明CARMA1和Notch1之間有潛在的聯(lián)系。

本研究在T-ALL細(xì)胞系中敲除CARMA1，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖及Notch1介導(dǎo)的NF-κB活性受到顯著抑制。有趣的是在CCRF-CEM細(xì)胞系中并沒有發(fā)現(xiàn)這樣的現(xiàn)象，CCRF-CEM是SIL-TAL1融合基因陽性的細(xì)胞系，其生存可能依賴于TAL1轉(zhuǎn)錄復(fù)合體，不依賴于CARMA1的表達(dá)。體內(nèi)實驗表明CARMA1的敲除顯著延長小鼠壽命，肝、脾、骨髓和淋巴的浸潤明顯減少。結(jié)果提示CARMA1可能對SIL-TAL1陰性T-ALL細(xì)胞的增殖和Notch1介導(dǎo)的NF-κB活化發(fā)揮重要作用，有可能是T-ALL的一個潛在治療靶點。

墻報：鞠文博士報告骨髓巨噬細(xì)胞在造血移植中的作用

造血干細(xì)胞移植（HSCT）是治療惡性血液系統(tǒng)疾病的有效手段。供者HSC成功植入是HSCT成功的基礎(chǔ)。植入功能不良( PGF)發(fā)生率雖然不高，但由于具體機(jī)制尚不清楚且無有效的干預(yù)措施，一旦發(fā)生，死亡率較高，是HSCT后嚴(yán)重并發(fā)癥之一。

研究認(rèn)為，PGF與造血微環(huán)境關(guān)系密切。骨髓巨噬細(xì)胞作為造血微環(huán)境的重要組成部分，能夠維持造血微環(huán)境的穩(wěn)態(tài)。另外巨噬細(xì)胞也是重要的炎性細(xì)胞，故通常認(rèn)為其在HSCT的骨髓中還介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。為此，為了探究巨噬細(xì)胞在骨髓抑制以及移植后骨髓微環(huán)境中扮演的角色，本課題組建立小鼠同基因HSCT模型和亞致死劑量骨髓移植模型，并特異性清除受者體內(nèi)的巨噬細(xì)胞，探究巨噬細(xì)胞在造血重建中發(fā)揮的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，特異性清除巨噬細(xì)胞可降低兩種模型小鼠生存率，抑制外周血及骨髓造血重建；其可能與巨噬細(xì)胞的清除引起白細(xì)胞分化有關(guān)，但具體機(jī)制尚需進(jìn)一步闡明。

以上結(jié)果初步說明巨噬細(xì)胞在造血重建中發(fā)揮重要作用，提示靶向巨噬細(xì)胞對于提高移植效率，防止植入功能不良的發(fā)生具有重要意義。